周怡，字顺之，太平县人。在做诸生时，曾说过：“油锅之刑不避，沟壑之死不忘本志，可以称士了。不是这样，都是虚伪的。”跟王畿、邹守益学习。考上嘉靖十七年(1538)进士。授顺德推官。举选卓异才士，他被提升为吏科给事中。上疏弹劾尚书李如圭、张瓒、刘天和。刘天和辞官离去，李如圭回到原籍等待检查，张瓒留用如前。不久，周怡弹劾湖广巡抚陆杰、工部尚书甘为霖、采木尚书樊继祖。立朝才一年，被周怡摧击的，一概是当权有势力的大臣。在朝廷的大臣多半对他侧目，周怡更加奋而不顾。
二十二年(1543)六月，吏部尚书许赞带领他的属下王与龄、周钅夫揭发攻击大学士翟銮、严嵩私属事。皇帝正向着严嵩，反而责罚许赞，驱逐王与龄等人。周怡上疏说：
“人臣以尽心报效国家为忠，协力济事为和。没有公卿大臣诤谏于朝廷、文武大臣诤谏于边事，即能修内治、防御外侮的事。大学士翟銮、严嵩和尚书许赞互相诋毁攻击，而总兵官张凤、周文又与总制侍郎翟鹏、督饷侍郎赵廷瑞互相过不去，这是最不祥的事情，误国有什么比这更厉害的呢？
“现在陛下天天从事祷祠，但四方灾害没有消除，岁开输银的先例而府库没有得到充实，多次颁布免租的命令而百姓并未得复苏，经常下令选将练兵而边境未曾得到安宁。国内财货匮乏而百役兴起，而国外则敌寇横行，九边损亏。翟銮、严嵩凭藉皇上的宠幸，背公营私，执掌威福，卖恩报怨。辅臣如果真正明了人的贤还是不肖，应当明告吏部将他们进官或退官，不应当挟势徇私，而决定其进退。严嵩气焰嚣张，欺凌百司。凡是有陈奏的人，总是跑到他的家里，先获得他的意图然后才敢向陛下奏闻。朝廷内外不畏怕陛下，只畏怕严嵩已经很久了。翟銮污浊委靡，许赞虽然小心谨畏，但不能用正直的气色消除权贵贪求之心，柔软得过分了。
“虽然直言敢谏的臣子，对权贵不利，对朝廷则是大利。御史谢瑜、童汉臣因弹劾严嵩的缘故，严嵩都假借其他的事情将他们入罪。谏诤的臣子自此被钳制住口，虽然有木兀、兜，谁又说这件事呢？”
皇帝看了疏章后大怒，下诏令谴责他是诽谤，叫他上殿诉述供词。在殿前的阙下用杖拷打，再次禁锢在诏狱中。
隆庆元年(1567)起用为故官。未上任，被提升为太常少卿。周怡陈讲新政五事，语言多讽刺中宫贵人。当时皇帝身边的人正在道上宴游，因此忤逆圣旨，被贬出任登、莱兵备佥事。给事中岑用宾为周怡诉讼冤屈，皇帝不采纳他的话。改任南京国子监司业。又被召封为太常少卿，未上任就死去了。天启初年，追赠谥号恭节。
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